Việc đưa vào vận hành có thu phí là dựa vào các quyết định của UBND tỉnh Tiền Giang (cơ quan nhà nước có thẩm quyền về dự án) về việc đưa dự án vào khai thác và việc qui định giá dịch vụ sử dụng đường bộ đối với tuyến đường.

Theo đó, giá vé thấp nhất áp dụng đối với xe nhóm 1 (xe ô tô dưới 12 chỗ, xe tải có tải trọng dưới 2 tấn và xe buýt vận tải khách công cộng) là 2 ngàn đồng/xe/km, tương đương hơn 100 ngàn đồng/xe khi xe di chuyển suốt cả tuyến đường dài khoảng 51km.

Giá vé cao nhất áp dụng đối với xe nhóm 5 (xe tải có tải trọng 18 tấn trở lên, xe container 40 feet) là 6.500 đồng/xe/km, tương đương khoảng 330 ngàn đồng khi xe di chuyển suốt tuyến đường.

Mức giá nói trên giảm so với mức giá tối đa qui định tại Thông tư số 28/2021/TT-BGTVT (nhóm 1 giảm gần 5%, nhóm 3 giảm hơn 20%, nhóm 4 giảm hơn 43%, nhóm 5 giảm hơn 45%).

Khi đưa vào vận hành có thu phí, tất cả các phương tiện phải sử dụng dịch vụ thu phí tự động không dừng (ETC).

Thời gian thu phí hoàn vốn dự kiến 14 năm 8 tháng.

Trước đó, từ ngày 30.4.2022, Dự án Cao tốc Trung Lương - Mỹ Thuận đã được đưa vào vận hành phục vụ người dân lưu thông không thu phí để phục vụ người dân, đồng thời qua đó để đánh giá khách quan về chất lượng và tìm ra các bất cập cần phải giải quyết để nâng cao hơn nữa chất lượng phục vụ của công trình.